ICS 11.120.20 C 30 DB13 河 北 省 地 方 标 准 DB 13/T 5127.2—2019 植入性医疗器械 高分子材料 浸提液中 有毒有害物质的测定 第 2 部分：二巯基丙 醇迁移量 碘量法 2019 - 12 - 27 发布 河北省市场监督管理局 2020 - 01 - 28 实施 发 布 DB13/T 5127.2—2019 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 DB13/T 5127《植入性医疗器械 高分子材料 浸提液中有毒有害物质的测定》共分16个部分： ——第1部分：柠檬酸钠和乙二胺四乙酸二钾迁移量 原子吸收分光光度法； ——第2部分：二巯基丙醇迁移量 碘量法； ——第3部分：葡萄糖迁移量 碘量法； ——第4部分：柠檬酸迁移量 酸碱中和滴定法； ——第5部分：硫氰酸胍迁移量 分光光度法； ——第6部分：丙酮迁移量 气相色谱法； ——第7部分：丙交酯迁移量 气相色谱法； ——第8部分：对苯二甲酸迁移量 高效液相色谱法； ——第9部分：乙醇迁移量 气相色谱法； ——第10部分：环氧乙烷迁移量 气相色谱法； ——第11部分：戊二醛迁移量 高效液相色谱法； ——第12部分：异氰酸酯迁移量 高效液相色谱法； ——第13部分：甲醛迁移量 气相色谱质谱联用法； ——第14部分：蛋白质迁移量 可见-紫外分光光度法； ——第15部分：铅、砷、镉、铬、铜、锑、钡、铝、锌、锡迁移量 电感耦合等离子体质谱法； ——第16部分：生物负载 薄膜过滤法。 本部分为DB13/T 5127的第2部分。 本部分由河北省药品监督管理局提出并归口。 本部分起草单位：河北省医疗器械与药品包装材料检验研究院。 本部分主要起草人：杨光、刘华、刘若锦、王丽、胡建。 I DB13/T 5127.2—2019 植入性医疗器械 高分子材料 浸提液中有毒有害物质的测定 第 2 部分：二巯基丙醇迁移量 碘量法 1 范围 本标准规定了植入性医疗器械高分子材料浸提液中二巯基丙醇迁移量的碘量法的测定方法。 本标准适用于植入性医疗器械高分子材料浸提液中二巯基丙醇迁移量的测定。 本方法二巯基丙醇的检出限为 0.04 mg/mL。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和实验方法 GB/T 16886.12 医疗器械生物学评价 第12部分：样品制备与参照材料 3 方法原理 直接碘量法是用碘滴定液直接滴定二巯基丙醇（2,3-dimercaptopropanol）的方法。在滴定过程 中，二巯基丙醇能与碘单质发生氧化还原反应。由过量碘的淡黄色作为滴定终点。 4 试剂与材料 除另有规定外，所用的试剂应为优级纯，试验用水应符合GB/T 6682规定的二级水的要求。 4.1 碘滴定液（0.05 mol/L）。 4.2 氯仿（分析纯）。 4.3 无水乙醇（分析纯）。 5 试剂配制 碘滴定液（0.005 mol/L）：取 4.1 碘滴定液（0.05 mol/L）用试验用水稀释 10 倍。 6 仪器与设备 6.1 棕色碱式滴定管。 6.2 刻度移液管。 1 DB13/T 5127.2—2019 6.3 容量瓶。 6.4 具塞锥形瓶。 7 试液制备 7.1 浸提试验 7.1.1 浸提溶液 本标准采用模拟浸提方式，以水为浸提介质。 7.1.2 浸提条件和方法 7.1.2.1 浸提条件建立在通常可行并经论证为一个标准化方法的基础之上，在多数情况下为产品使用 的适当加严的条件。应在下列之一的条件下进行浸提： a) (37±1)℃,(24±2) h； b) (37±1)℃,(72±2)h； c) (50±2)℃,(72±2) h； d) (70±2)℃,(24±2) h； e) (121±2)℃,(1±0.1)h。 7.1.2.2 可用标准表面积确定所需的浸提介质的体积。标准表面积包括样品两面面积的总和，不包括 不确定和不规则面积。当由于样品外形不能确定其表面积时，应使用质量/浸提液体积。见表1。 表1 标准表面积和浸提液体积 厚度 浸提比例 （mm） （表面积或质量/体积）±10% 膜、薄片、管壁 ＜0.5 6 cm / mL 管壁、厚板、小型模制件 0.5～1.0 3 cm / mL 大型模制件 ＞1.0 3 cm / mL 弹性密封件 ＞1.0 1.25 cm / mL 粉剂、球体、泡沫材料、无吸收性模制件 不规则形状固体器械 0.2 g/ mL 薄膜、织物 不规则形状多孔器械（低密度材料） 0.1 g/ mL 材料形态举例 2 2 2 2 注1：现在尚无测试吸收剂和水胶体的标准化方法，推荐以下方案： 2 注2：测定材料浸提介质吸收量（每0.1 g或1.0cm 材料所吸收的量）； 2 注3：在进行浸提时，对浸提混合物按每0.1 g或1.0 cm 额外加入该浸提介质吸收量。 7.1.2.3 对于弹性体、涂层材料、复合材料、多层材料等，由于完整表面与切割表面存在潜在的浸提 性能差异，因此应尽量完整地进行浸提。 7.2 标准工作液制备 精密称取约1.000 g二巯基丙醇于100 mL容量瓶中，试验用水定容，摇匀。制得约10 mg/mL二巯基 丙醇储备液。 分别精密移取0.20、0.30、0.40、0.50、0.80、1.00、1.20 mL储备液于10 mL容量瓶中，试验用 水定容，摇匀。即得0.20、0.30、0.40、0.50、0.80、1.00、1.20 mg/mL的二巯基丙醇系列标准溶液。 2 DB13/T 5127.2—2019 7.3 空白液制备 以同批浸提介质作为空白试验液。 8 测定 8.1 标准曲线测定 用移液管分别精密量取上述系列标准溶液3 mL，置锥形瓶中，用氯仿-无水乙醇(体积比=1:3)10 mL 分数次洗涤移液管内壁，洗液并入锥形瓶中，用氯仿-无水乙醇(体积比=1:3)40 mL，摇匀，用碘滴定 液(0.005 mol/L)滴定，至溶液显持续的微黄色，并将滴定的结果用空白试验校正。以浓度为横坐标， 消耗碘标准溶液的体积为纵坐标绘制标准曲线，并求出回归方程。 8.2 样品测定 取样品5个，以水为浸提介质制备浸提液。用移液管精密量取1 mL浸提液，置锥形瓶中，用氯仿无水乙醇(体积比=1:3)10 mL分数次洗涤移液管内壁，洗液并入锥形瓶中，用氯仿-无水乙醇(体积比 =1:3)40 mL，摇匀，用碘滴定液(0.005 mol/L)滴定，至溶液显持续的微黄色，并将滴定的结果用空白 试验校正。 9 结果计算 浸提液中二巯基丙醇的含量按公式（1）计算。 ………………………………………………（1） 式中： C——浸提液中二巯基丙醇的浓度，单位为毫克每升（mg/L）； y ——浸提液消耗碘标准溶液(0.005 mol/L)的体积（mL）； a ——回归曲线的斜率； b ——回归曲线的截距； ρ ——稀释倍数。 样品中二巯基丙醇的特定迁移量按公式（2）计算。 M  C A  1000 …………………………………………（2） 式中： 2 M ——特定迁移量，mg/cm 或 mg/g； A ——浸提比例，cm2/mL或g/mL。 计算结果以平行测定值的算术平均值表示，保留三位有效数字。 10 确证 当浸提液中检出二巯基丙醇时，用附录A气相色谱法进行确证。 3 DB13/T 5127.2—2019 11 精密度 浸提液中目标物在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 4 DB13/T 5127.2—2019 附 录 A (规范性附录) 气相色谱法 A.1 原理 在酸性条件下，二巯基丙醇与砷（Ⅲ）迅速反应生成环状的二硫胂化合物，用气相色谱法测定。 A.2 仪器 63 气相色谱仪（含 Ni电子捕获检测器）。 A.3 色谱参考条件 根据所用仪器型号选择最佳测定条件。 参考条件：色谱柱：OV -17 弹性石英毛细管柱 (内径 0.32 mm ×长 30 m , Supelco 公司)；检 63 测器： Ni电子捕获检测器；载气：高纯氮(99.999 %)；流速：2.4 mL/min ；补充气流速：35 mL/min ； 分流比：20∶1 ；电 流：0.5 nA ；柱温 TC：140 ℃保持3min，然后以5℃/ min升至 160 ℃ 保持0min， 再以 40℃/ min 升至210 ℃保持4 min；进样器温度TV：250 ℃；检测器温度TD：280 ℃。 A.4 测定 精密称取约1.000 g二巯基丙醇于100 mL容量瓶中，试验用水定容，摇匀。制得约10 mg/mL二巯基 丙醇储备液。 分别精密移取0.20、0.30、0.40、0.50、0.80、1.00、1.20 mL储备液于10 mL容量瓶中，试验用 水定容，摇匀。即得0.20、0.30、0.40、0.50、0.80、1.00、1.20 mg/mL的二巯基丙醇系列标准溶液。 取1μ g/mL砷（Ⅲ）溶液1mL，加入2mol/mL盐酸4mL，加入0.5mL二巯基丙醇标准溶液，振荡5 min，加 入甲苯1 mL，旋涡混合2 min ，3 000 r/min离心5 min ,取上层有机溶液 2μ L进样分析。 取样品5个，以水为浸提介质制备浸提液。用移液管精密移取0.5 mL，用上述条件处理后测定。 _________________________________ 5