ICS 65.020.01 CCS B 05 13 河 北 省 地 方 标 准 DB 13/T 5494—2022 红树莓组培苗培育技术规程 2022 - 02 - 28 发布 2022 - 03 - 31 实施 河北省市场监督管理局 发 布 DB 13/T 5494—2022 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草。 本文件由河北省林业与草原局提出。 本文件起草单位：河北农业大学，中国林业科学研究院林业研究所，迁安市农业农村局，唐山 动物园，河北子水农业科技有限公司。 本文件主要起草人：张雪梅、李迎超、顾玉红、李寒、郭向华、郭素萍、齐国辉、刘洋、刘颖 华、栾好安、贾鹏、郭恒。 I DB 13/T 5494—2022 红树莓组培苗培育技术规程 1 范围 本文件规定了红树莓组培育苗过程中的茎段选择、消毒灭菌、初代培养、继代培养、生根培养、 组培苗移栽等技术要求。 本文件适用于红树莓的组培苗工厂化生产。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用 文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单） 适用于本文件。 GB/T 19791 温室防虫网设计安装规范 GB/T 35240 树莓苗木质量分级 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 红树莓 红树莓（Rubus idaeus L）为蔷薇科悬钩子属多年生落叶半灌木。 4 组培茎段的选择及处理 组培茎段的选择 选择生长健壮的当年生红树莓茎段。 组培茎段的处理及要求 茎段剪成长1.5 cm～2.5 cm，每段有1个饱满芽。 5 初代培养 培养基配制及灭菌 选用诱导芽萌发生长的培养基（MS+6-BA 0.2 mg/L+GA3 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂5 g/L ）， 2 pH值为5.8。高压灭菌锅的压力上升到1.1 kg/cm ，121℃条件下灭菌20 min。 茎段消毒灭菌 茎段用洁净自来水冲洗30 min以上，在超净工作台，用75%酒精冲洗30 s～40 s，无菌水冲洗3次， 再用2%的NaClO溶液处理3 min～4 min，处理过程用玻璃棒不断搅拌，再用无菌水冲洗3～5次。 茎段接种 将消毒灭菌的茎段在无菌条件下接种到5.1的培养基中。 培养室环境条件 培养室的温度23 ℃～25 ℃，湿度20 %～30 %，光照强度2200 Lx～2500 Lx，光照时间为12 h～14 h。最适宜光质为白LED。 1 DB 13/T 5494—2022 初代苗培养 在5.4的环境下进行培养，直至茎段侧芽萌发的新稍长至2 cm～2.5 cm高时即可进行继代。 6 继代培养 培养基配制及灭菌 芽分化培养基成分：MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂5 g/L，培养基pH值为 5.8，灭菌条件同5.1。 继代接种 在5.4的环境下进行继代，将初代苗剪成1 cm～1.5 cm、带2～3个芽的茎段接种到6.1的培养基中。 继代苗培养 在5.4环境下进行培养，直至分化后的芽萌发长至2 cm～2.5 cm高时即可继续进行继代培养或生 根培养。 7 生根培养 培养基配制及灭菌 生根培养所用培养基成分：1/2MS+6-BA0.3 mg/L+IAA0.2 mg/L+糖15 g/L+琼脂4.8 g/L，培养基 pH值为5.8。灭菌条件同5.1。 培养室环境条件 培养室的环境同5.4。 生根苗培养 培养45 d左右，组培苗高3 cm～5 cm，长出3～5条白色根时可进行瓶内炼苗。 8 瓶内炼苗 将生根苗的组培瓶半开盖，在5.4条件下于瓶内炼苗1周。 9 组培苗移栽 移苗季节 组培苗的生长不受季节的影响，如果温室条件适宜，一年四季均可出瓶移栽。 移苗前基质准备 在设施内准备好移苗床。苗床铺上装好基质的穴盘。基质要求保水性、排水性和透气性良好。 以泥炭:珍珠岩:蛭石=4:3:3混匀为宜，用5 % KMnO4溶液对基质进行消毒，以喷雾方式将基质喷透为 准，用塑料布盖严基质30 min后用清水冲洗干净。 组培苗出瓶后的处理 组培苗从瓶中取出，放在20 ℃左右的温水中，将附着在根上的培养基清洗掉，注意不能伤根， 过长的根需要适当修剪。再放入温水中清洗1次，将培养基彻底洗掉，以免残留的培养基引起污染和 霉烂，之后用800倍的多菌灵或百菌清消毒1 min～2 min。 组培苗定植 在穴盘上每孔栽1株，先挖一小穴，舒展根系，深度以叶片不接触基质、中心叶不埋入土内为宜， 栽植后轻轻镇压。栽好后用细喷雾器喷水，冲掉叶面上沾着的基质，并使基质和根系密切接触。 2 DB 13/T 5494—2022 组培苗移栽后管理 9.5.1 组培苗移栽后 10 d 内管理 移苗期间的温度保持在20 ℃～25 ℃；保持空气湿度在90%左右；光照一般在10000 lux～20000 lux；设施内每天早、晚适当通风。叶面喷施500倍的复合肥（N-P2O5-K2O=15-15-15），加速幼苗生长。 9.5.2 组培苗移栽后 11d～20d 管理 逐步降低空气湿度至50 %～60 %。 9.5.3 组培苗移栽后 21～30d 管理 组培苗移栽后21 d～30 d即转移到10 cm×10 cm的营养杯内，移栽时根系与基质一起移入土中， 并及时浇水。其他管理条件同9.2.5。在营养杯内再长35 d～40 d，达到表1的组培苗标准即可出圃。 9.5.4 组培苗移栽后病虫害防治 主要病虫害防治方法见附录A.1，其他虫害采用防虫网，具体参考GB/T 19791-2005。 10 红树莓组培苗木质量分级 综合控制指标 芽体饱满，生长健壮，须根多，无病虫害，无机械损伤。 分级指标 综合控制达到要求的为合格苗木，按照地径、苗高、根系长度、根系数量和根团直径进行分级。 苗木质量等级 苗木质量见表1。 表 1 红树莓组培苗木质量分级 苗龄 1～0 地径 cm> 0.4 苗高 cm> 10 Ⅰ级苗 长度 cm 15 侧根数 20 条以上 根团直径 cm> 5 根系 苗木等级 Ⅱ 级 苗 根系 综合控制指标 地径 cm> 0.2～0.4 苗高 cm> 5～10 长度 cm 10～15 侧根数 10～20 根团直径 cm> 3～5 组培脱毒苗，顶芽完整，无机械损伤，无病虫害，不失水，有旺盛的生命力。 3 DB 13/T 5494—2022 A A 附 录 A (规范性) 红树莓组培苗出瓶后病虫害防治药剂用量 A.1 红树莓组培苗出瓶后病虫害防治药剂用量 防治病害、虫害 种类 药量 备注 — 500～800倍 基质消毒 52.5 % 根腐病、灰霉病 1 500倍 移栽后喷施 水剂 1.0 % 根腐病、灰霉病 1 500～2 000倍 移栽后喷施 阿维菌素 乳油 1.8 % 红蜘蛛 1 500～2 000倍 移栽后喷施 乙螨唑 悬浮剂 110 g/L 红蜘蛛 3 000～4 000倍 移栽后喷施 药剂名称 剂型 KMnO4 粉剂 异菌多菌灵 悬浮剂 多抗霉素 4 浓度