ICS 65.020.20 CCS B 61 玉 5304 溪 市 地 方 标 准 DB 5304/T 052—2021 切花月季组培苗生产技术规程 2021 - 12 - 16 发布 2022 - 02 - 15 实施 玉溪市市场监督管理局 发 布 DB 5304/T 052—2021 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由玉溪市农业科学院提出。 本文件由玉溪市市场监督管理局归口。 本文件起草单位：玉溪市农业科学院、通海锦海农业科技发展有限公司。 本文件主要起草人：李晓亮、张军云、董春富、段永华、张钟、杨进成、邓成忠、张玉荣、左丽娟、 蔡述江、林姣姣。 I DB 5304/T 052—2021 切花月季组培苗生产技术规程 1 范围 本文件规定了切花月季组培苗生产的缩略语、外植体的选择采集及室内预处理、外植体灭菌、初代 培养、增殖培养、生根培养、炼苗移栽、栽后管理、出苗的质量要求。 本文件适用于玉溪市切花月季组培苗生产。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 NY/T 1276 农药安全使用规范总则 NY/T 2306 花卉种苗组培快繁技术规程 3 缩略语 下列缩略语适用于本文件： a） MS：是培养基发明人 Murashige 和 Skoog 名字的缩写，是植物组织培养中常用的基本培养基 （组分及含量参见附录 A，配制方法按照 NY/T 2306 执行）。 b) 6-BA：6-苄氨基腺嘌呤，6-Benzyl aminopurine（配制方法按照 NY/T 2306 执行）。 c) NAA：α-萘乙酸，Naphthylacetic acid（配制方法按照 NY/T 2306 执行）。 d) GA3：赤霉素，Gibberellic acid（配制方法按照 NY/T 2306 执行）。 e) IBA：3-吲哚丁酸，Indole-3-butyric acid（配制方法按照 NY/T 2306 执行）。 f) AC：活性炭，active carbon。 4 外植体的选择采集及室内预处理 4.1 选择 选择生长健壮、无病虫害、含5~10个以上腋芽的当年生切花月季枝条。 4.2 采集 在枝条采集前3~4天，停止日常的浇水和施肥管理，于晴天的中午选择采集切花月季枝条。截取枝 条后，立即将枝条基部放在盛有少量清水的水桶，迅速带回组培室处理。 4.3 剪切 切花月季枝条一旦带到组培室，立即将枝条截取成长约1cm的含腋芽茎段。 4.4 清洗 1 DB 5304/T 052—2021 先流水冲洗茎段0.5min；再用洗洁精水溶液浸泡3min；浸泡后流水冲洗1min。 5 外植体灭菌 在超净工作台上先用75%的酒精浸泡消毒60s，再用0.2%升汞（HgCl2）溶液灭菌茎段8~10min，最 后用无菌水浸泡4min，用无菌滤纸吸干茎段的表面水分。 6 初代培养 将灭菌好的茎段接种入MS+6-BA1.0~3.0mg/L+NAA0.1~0.2mg/L+GA31.0~2.0mg/L+白砂糖30g/L+琼 脂粉（强度1200 g/cm2 ）5.2~5.5g/L的培养基中培 养，培养温度控制在25±2℃范 围内，光照强度 2000~3000Lx，光照时间12h/天，培养30~60d后，茎段的腋芽分化长成健壮的芽或苗，每个茎段诱导形 成1~3个（或株）芽或苗。 7 增殖培养 将 培 养 获 得 的茎 段 或 芽 接种 入 MS+6-BA1.0~2.0mg/L+NAA0.01~0.05mg/L+GA31.0mg/L+ 白 砂 糖 30g/L+琼脂粉（强度1200 g/cm2）5.2~5.5g/L的培养基中增殖培养，继代周期为90d，培养温度控制在25±2℃ 范围内，光照强度2000~3000Lx，光照时间12h/天。增殖培养中存在植株或丛芽两种植物形态类型，成 株(芽)率和增殖系数较大。 8 生根培养 将增殖培养中获得的茎段或成单株个体的小苗接种到生根培养基1/2MS+6-BA0.5mg/L+ IBA1.0 mg/L+AC0.1%+白砂糖30g/L+琼脂粉（强度1200 g/cm2）5.2~5.5g/L或1/2MS+IBA0.5mg/L+AC0.1%+白 砂糖30g/L+琼脂粉（强度1200 g/cm2）5.2~5.5g/L中诱导生根，培养温度控制在25±2℃范围内，光照强度 2000~3000Lx，光照时间12h/天，培养时间60d。生根培养中，植株生根率达100%，生根方式为根从茎 段的基部发出且基部无愈伤组织，根系发育良好，植株生长势较好、健壮、深绿、叶片较大、无玻璃化、 无黄化。 9 炼苗移栽 9.1 炼苗 将植株生长健壮、整齐、叶绿、根系发育良好的切花月季组培瓶苗挑出，置瓶苗于自然环境中炼苗 7~14d。 9.2 洗苗 打开组培瓶盖，从瓶内轻轻地取出种苗，置于清水中，后洗净植株根部的培养基。 9.3 种苗质量分级 不同切花月季组培苗质量分级见表1。 2 DB 5304/T 052—2021 表 1 不同切花月季组培苗的质量分级 级别 生根量（条） 叶片数（片） 株高（cm） 一级 5 条以上 11 片以上 2.5~5.3 二级 3~4 7~10 2.0~5.1 三级 1~2 4~6 片 1.7~4.6 生根特点 根从基部发出，基部无愈伤 组织。 根从基部发出，基部无愈伤 组织。 根从基部发出，基部无愈伤 组织。 9.1 移栽 9.4.1 基质 由 V 椰糠︰V 珍珠岩=7︰2 组成，基质用水浸湿，并用 75%百菌清可湿性粉剂 1000 倍液喷洒，基 质含水量控制为 60%左右。 9.4.2 基质装袋 将基质装入直径约 2.6cm，高约 5.1cm 的无纺布营养袋中。 9.4.3 穴盘大小 128 孔的穴盘，穴盘长 58.1cm，宽 23.4cm，穴上孔直径为 3.1cm，深 3.7cm。 9.4.4 移栽 将 9.3 同一级别种苗的整株放入 75%百菌清可湿性粉剂 1000 倍液浸泡 30s 后，移栽入营养袋中（1 株/袋），再将营养袋放入穴盘内，置穴盘于大棚内的苗床上。 10 栽后管理 10.1 温度 适宜切花月季生长的温度为15~25℃，气温高于30℃或低于4℃均不利于切花月季的生长。夏季气温 ＞30℃时，要及时通风降温；冬季气温＜4℃时，要通过关闭大棚的四周侧窗、天窗、悬挂防寒幕等措 施增温。 10.2 湿度 移栽后，浇足定根水。每隔3~5d，打开塑料薄膜通气5~10min，并视情况补水，之后视基质湿度适 时浇水，控制基质含水量为60%左右。空气相对湿度控制在白天75%以下，夜间80%以下，冬春季在棚 内拉一层内膜，以阻断棚顶的水滴掉落到植株上。雨季、冬春季期间，要打开侧窗、天窗（不下雨时） 加强通风，以降低空气相对湿度。 10.3 光照 3 DB 5304/T 052—2021 移栽后，用塑料薄膜覆盖穴盘，用遮阳网、遮阴网遮光，使遮光率达70%~80%，15~20d后揭开塑 料薄膜，撤去遮阳网、遮阴网。之后为棚内的全光照 10.4 施肥 塑料薄膜揭开后，即可开始施肥。每次按平衡复合肥: 磷酸二氢钾:硝酸钾=5:2:1的用量比，配成 浓度为0.2%~0.4%，pH值6.0~6.5的水溶液进行浇施。每周1次，施肥4~5次。 10.5 病虫害防治 按照农药安全使用规范总则（NY/T 1276）、附录B进行切花月季组培苗的主要病虫害防治。 11 出苗的质量要求 根系发育良好，植株生长健壮，无病虫害，无明显药害。 4 DB 5304/T 052—2021 A A 附 录 A （资料性） MS 培养基的组分及含量 表A.1 MS 培养基的组分及含量 名称 大量元素 微量元素 成分 规定含量（mg/L） NH4NO3 1650 KNO3 1900 MgSO4·7H2O 370 KH2PO4 170 CaCl2·2H2O 440 ZnSO4·7H2O 8.6 MnSO4·4H2O 22.3 H3BO3 6.2 KI 0.83 NaMoO4·2H2O 0.25 CuSO4·5H2O 0.025 CoCl2·6H2O 0.025 Na2·EDTA 37.3 FeSO4·7H2O 27.8 甘氨酸 2.0 盐酸硫胺素（B1） 0.1 盐酸吡哆醇素（B6） 0.5 烟酸 0.5 肌醇 100 铁盐 有机物 肌醇 5 DB 5304/T 052—2021 B B 附 录 B （资料性） 切花月季组培苗的主要病虫害及防治方法 表A.2 切花月季组培苗的主要病虫害及防治方法 病虫害名称 危害部位及症状 白粉病 叶片、叶柄、嫩稍；白色粉状物。 防治方法 70%甲基托布津 800 倍液或 75%多菌灵 1000 倍液交替喷雾 2~3 次。 加强通风；及时清除病叶病枝；50%速克灵 可湿性粉剂 1000~1500 倍液，或 50%扑海 灰霉病 叶、枝条；灰色霉点或层。 因可湿性粉剂 800 倍液，或 50%多霉清可 湿性粉剂 600 倍液交替喷雾 2~3 次。 加强通风；降低湿度；75%百菌清可湿性粉 叶、茎；水渍状斑点、褐色斑块、 剂 500 倍液，或 58%甲霜锰锌可湿性粉剂 霜状霉层。 500 倍液或 69%烯酰锰锌可湿性粉剂 800 霜霉病 倍液交替喷雾 2~3 次。 加强通风；用 73%克螨特乳油 1500~2000 倍液、20%三氯杀螨醇 500~1000 倍液、15% 叶片；叶正面有失绿的黄褐色小 红蜘蛛 哒螨灵乳油 2000 倍液、 40％氧化乐果 1000 点、叶片失绿卷缩脱落。 倍液、15%哒螨灵乳油 2000 倍液交替喷雾 2~3 次。 6